产品货号:
BTN51206
中文名称:
Taq DNA聚合酶
英文名称:
Taq DNA Polymerase
产品规格:
500U
发货周期:
1~3天
产品价格:
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本产品是Thermus aquaticus(水生栖热菌)的DNA聚合酶基因在E. coli中表达而得,具有以双链DNA为模板的5′→3′聚合酶活性和5′→3′外切酶活性。Taq DNA聚合酶长为832个氨基酸,分子量为94 Kd。该酶可以广泛用于PCR,RT-PCR,加尾反应等。
产品特点:
1.耐热DNA聚合活性,该酶在90℃以上几乎无DNA合成,在75~80℃时延伸率约150个核苷酸,70℃时为60个核苷酸/秒,55℃时为24个核苷酸/秒。在65~68℃并有Mn2+存在时还具有逆转录活性。
2.热稳定,在PCR混合物中95℃保温40分钟仍可保持50%的活性。
3.Mg2+离子依赖性,MgCl2浓度在2.0mM时该酶催化活性最高。
4.本酶无3′→5′外切活性,不具3′→5′校对功能,碱基错配机率为2.1×10-4。
产品组成:
储存条件:低温运输,-20℃保存,有效期一年。
使用方法:(以λDNA为模板进行PCR扩增反应为例)
1.按下列组份配制PCR反应液。
注:10×PCR Buffer含15mM MgCl2(在PCR体系中的终浓度为1.5mM),是否需要补加MgCl2根据实验决定。但一般不需要补加。
推荐50μL PCR反应体系中模板DNA推荐使用量
2.PCR反应条件
以λDNA为模板,扩增1kbp的DNA片段的PCR反应条件如下:
注:PCR反应条件视模板、引物等的结构条件不同而各异。在实际操作中需根据模板、目的片段的大小、碱基序列和引物的长短等具体情况,设定最佳的反应条件(温度、时间等)。
注意事项:
PCR的反应液请在冰中配制,然后置于PCR反应仪上进行PCR反应。这种冷启动法可增强PCR扩增的特异性,减少PCR过程中的非特异性反应,能得到良好的PCR结果。
相关搜索:Taq DNA聚合酶,Taq DNA Polymerase
产品特点:
1.耐热DNA聚合活性,该酶在90℃以上几乎无DNA合成,在75~80℃时延伸率约150个核苷酸,70℃时为60个核苷酸/秒,55℃时为24个核苷酸/秒。在65~68℃并有Mn2+存在时还具有逆转录活性。
2.热稳定,在PCR混合物中95℃保温40分钟仍可保持50%的活性。
3.Mg2+离子依赖性,MgCl2浓度在2.0mM时该酶催化活性最高。
4.本酶无3′→5′外切活性,不具3′→5′校对功能,碱基错配机率为2.1×10-4。
产品组成:
成分 | 规格 |
Taq DNA聚合酶(5U/μL) | 20μl |
10×PCR Buffer(含Mg2+) | 1ml |
MgCl2,25mM | 1ml |
说明书 | 1份 |
储存条件:低温运输,-20℃保存,有效期一年。
使用方法:(以λDNA为模板进行PCR扩增反应为例)
1.按下列组份配制PCR反应液。
Taq DNA聚合酶(5U/μl) | 0.25μl |
10×PCR Buffer(含Mg2+) | 5μl |
MgCl2(25mM) | 根据需要补加 |
自备dNTP(各2.5mM) | 4μl |
模板DNA | 见下 |
引物1(20μM) | 1μl |
引物2(20μM) | 1μl |
灭菌蒸馏水 | Up to 50μl |
注:10×PCR Buffer含15mM MgCl2(在PCR体系中的终浓度为1.5mM),是否需要补加MgCl2根据实验决定。但一般不需要补加。
推荐50μL PCR反应体系中模板DNA推荐使用量
哺乳动物基因组DNA | 0.5-1μg |
酵母基因组DNA | 5-500ng |
细菌基因组DNA | 0.5-50ng |
质粒DNA | 5-500pg |
PCR回收片段 | 1-100pg |
2.PCR反应条件
以λDNA为模板,扩增1kbp的DNA片段的PCR反应条件如下:
注:PCR反应条件视模板、引物等的结构条件不同而各异。在实际操作中需根据模板、目的片段的大小、碱基序列和引物的长短等具体情况,设定最佳的反应条件(温度、时间等)。
注意事项:
PCR的反应液请在冰中配制,然后置于PCR反应仪上进行PCR反应。这种冷启动法可增强PCR扩增的特异性,减少PCR过程中的非特异性反应,能得到良好的PCR结果。
相关搜索:Taq DNA聚合酶,Taq DNA Polymerase